Western Blot是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遇傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過聚丙烯酰疑膠電泳分離細(xì)胞或者組織樣本中的蛋白,經(jīng)轉(zhuǎn)膜、封閉后目標(biāo)蛋白與特有性一抗結(jié)合,再與辣根過氧化物醇(HRP)標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色,分析光條帶的位置和灰度分析獲知目標(biāo)蛋白在樣本中的表達(dá)情況(見4.4)・該法結(jié)合了凝膠電泳和固相兔疫測定兩種技術(shù)的高特異性和高敏感性可以對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行定型和半定量的分析
通過抗原抗體反應(yīng)對(duì)目標(biāo)蛋白的表達(dá)進(jìn)行半定檢,還可用于置白-置白、蛋-DNA和蛋白-RNA相互作用的后姨分析。WB作為一種方便可靠的研究工,將與和蛋白質(zhì)芯片等技木一起在蛋白質(zhì)組時(shí)代發(fā)重要作用。